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| 銷售商： 上海雅吉生物科技有限公司 | 查看該公司所有產(chǎn)品 >> |
- 介紹： 基 因 型F- mcrAΔ(mcrBC-hsdRMS-mrr) recA1 endA1 lon gyrA96 thi supE44 relA1 λ-Δ(lac-proAB)簡 要 說 明Stbl2菌株來源于JM109 E.coli strain，適合克隆不穩(wěn)定插入片段（正向重復(fù)序列，逆轉(zhuǎn)錄病毒序列等）；mcrA突變和mcrBC-hsdRMS-mrr deletion使該菌株更適于克隆甲基化的基因組序列；同時Stbl2也可用于慢病毒載體的構(gòu)建。recA1和endA1的突變有利于克隆DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。不存在lacIqZΔM15，不可用于藍、白斑篩選。High5TM系列Stbl2感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，經(jīng)pUC19檢測轉(zhuǎn)化效率可達109cfu/μg DNA。操 作 說 明1.Stbl2感受態(tài)細胞放置冰中融化（或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中），加入目的DNA（質(zhì)粒或連接產(chǎn)物）并用手撥打EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。3.向離心管中加入0.9 mL 室溫 S.O.C. 培養(yǎng)基或LB培養(yǎng)基(推薦使用SOC培養(yǎng)基，提高轉(zhuǎn)化效率)。4.30℃，225 rpm復(fù)蘇90分鐘。（當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時，30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率，若轉(zhuǎn)化control PUC19計算轉(zhuǎn)化效率，則需37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘。）5. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C.培養(yǎng)基上。6.將平板倒置放于30℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。（若轉(zhuǎn)化control PUC19 計算轉(zhuǎn)化效率，則需37℃培養(yǎng)過夜）。注 意 事 項1.感受態(tài)細胞最好在冰上融化。2.混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。4.S.O.C.或LB培養(yǎng)基均可使用，S.O.C.可提高轉(zhuǎn)化效率20%；實驗人員可選擇在37℃或30℃培養(yǎng)細胞，37℃條件下，菌生長速度加快，有利于提高質(zhì)粒產(chǎn)量，30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組概率。附：S.O.C. Medium配方2% Tryptone0.5% Yeast Extract10 mM NaCl2.5 mM KCl10 mM MgCl210 mM MgSO420 mM glucoseNaOH調(diào)pH值至7.0
- 儲存條件： -80℃
- 用途： 克隆感受態(tài)細胞
- 注意：部分產(chǎn)品我司僅能提供部分信息，我司不保證所提供信息的權(quán)威性，僅供客戶參考交流研究之用。
試劑盒售后：本公司出售的試劑盒均保質(zhì)保量，質(zhì)量問題均可免費退換，另提供免費代測服務(wù)。
細胞售后：
1. 細胞運輸丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā)；
3. 細胞收到當(dāng)天以及第2,3天請拍照，未告知的視為產(chǎn)品合格。4-10天內(nèi)出現(xiàn)問題，請?zhí)峁┘毎掌图毎霈F(xiàn)問題的照片以及細胞相關(guān)操作的詳細步驟，并跟我公司人員及時溝通判定是否重發(fā)，具體可以參照我官網(wǎng)或者隨貨說明書相關(guān)售后條款。
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手機版：Stbl2 感受態(tài)細胞
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