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MG1655 感受態(tài)細(xì)胞
英文名稱:MG1655 Chemically Competent Cell總訪問:698
國產(chǎn)/進(jìn)口:國產(chǎn)半年訪問:3
產(chǎn)地/品牌:雅吉生物產(chǎn)品類別:動物試劑
規(guī)       格:MG1655 最后更新:2025-1-2
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  • 產(chǎn)品介紹
  • 公司簡介
  • 介紹: 基 因 型K12 F- lambda- ilvG- rfb-50 rph-1簡 要 說 明 MG1655菌株來源于W1485,是K12的衍生菌株,是一種經(jīng)過較少改造,比較接近于“WT-野生型”的大腸桿菌工程菌株。MG1655外觀形態(tài)標(biāo)準(zhǔn),同時可做為擴(kuò)增大腸桿菌WT型基因的模板使用,也可作為蛋白表達(dá)的宿主菌株使用,但不含核酸酶endA1突變,體內(nèi)核酸酶含量較高,提取質(zhì)粒時務(wù)必使用質(zhì)粒提取試劑盒中去蛋白液盡量去除核酸酶,以防提取的質(zhì)粒被降解。pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>0.5×108 cfu/μg DNA。操 作 說 明1. MG1655感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì);蜻B接產(chǎn)物)并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。4. 5000 rpm離心1分鐘收集菌體,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15 h。注 意 事 項1. 感受態(tài)細(xì)胞最好在冰中緩慢融化。插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。2. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì);蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。
  • 儲存條件: -80℃
  • 用途: 克隆感受態(tài)細(xì)胞
  • 注意:部分產(chǎn)品我司僅能提供部分信息,我司不保證所提供信息的權(quán)威性,僅供客戶參考交流研究之用。
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3. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請拍照,未告知的視為產(chǎn)品合格。4-10天內(nèi)出現(xiàn)問題,請?zhí)峁┘?xì)胞照片和細(xì)胞出現(xiàn)問題的照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟,并跟我公司人員及時溝通判定是否重發(fā),具體可以參照我官網(wǎng)或者隨貨說明書相關(guān)售后條款。
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