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當(dāng)前位置 > 產(chǎn)品目錄 > PCR儀 > 定量PCR > 獨(dú)活染料法PCR鑒定試劑盒
獨(dú)活染料法PCR鑒定試劑盒
英文名稱:Radix angelicae pubescentis總訪問:243
國產(chǎn)/進(jìn)口:國產(chǎn)半年訪問:2
產(chǎn)地/品牌:博湖產(chǎn)品類別:定量PCR
型       號(hào):50次 最后更新:2024-11-4
貨       號(hào):BH20252-P
參考報(bào)價(jià):
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  • 產(chǎn)品介紹
  • 公司簡介
產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是一管式超快植物種子和葉片基因組DNA 提取試劑,得到的產(chǎn)物可以直接用于PCR。整個(gè)過程簡單快速,尤其適合于大規(guī)模的轉(zhuǎn)基因植物篩選時(shí)樣品的制備。
1. 快速,整個(gè)過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對植物組織進(jìn)行冰凍、機(jī)械處理、純化或者DNA的沉淀。運(yùn)輸及保存2. 一管式,在一個(gè)試管內(nèi)完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運(yùn)輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動(dòng)化,適合于海關(guān)和企業(yè)進(jìn)行大規(guī)模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數(shù)植物葉片和種子。
使用及效果:將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
以下是PCR鑒定試劑盒訂購信息:
產(chǎn)品名稱:獨(dú)活染料法PCR鑒定試劑盒
英文名稱:Radix angelicae pubescentis    
產(chǎn)品規(guī)格:50次
運(yùn)輸:低溫
保存:負(fù)20度
有效期:一年
貨期:現(xiàn)貨
獨(dú)活染料法PCR鑒定試劑盒PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

應(yīng)用案例
樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
2.標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號(hào)管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號(hào)管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20  μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9.在 PCR 管中加入下列成分.
黃體生成素  Luteinizing Hormone  1.5  48  mIU/mL  0.1
混合功能氧化酶  Mixed-function oxidase  25  800  U/L  1
肌苷酸  inosincacid,inosinemonphosphate  3.125  100  μg/mL  0.1
肌酸激酶  Creatine Kinase  5  160  U/L  1
激素敏感性脂肪酶  Hormone-sensitive lipase  50  1600  U/L  10
甲狀腺素  thyroxine  0.625  20  ng/mL  0.1
堿性磷酸酶  alkaline phosphatase  3.125  100  U/L  0.1
結(jié)合珠蛋白  Haptoglobin  12.5  400  ng/mL  1
金屬硫蛋白  Metallothionein  10  320  pg/mL  1
精氨酸加壓素  arginine vasopressin  2.5  80  pg/mL  0.1
精氨酸酶  Arginase  1.5625  50  ng/mL  0.1
亮氨酸氨肽酶  leucine aminopeptidase  2  64  U/L  0.1
磷酸果糖激酶  Phosphofructokinase  0.75  24  U/mL  0.1
磷酸果糖激酶1  Phosphofructokinase 1  0.75  24  U/mL  0.1
磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶  phosphoenolpyruvate carboxykinase  3  96  IU/L  0.1
磷脂酰膽堿  phosphatidylcholine  15  480  pg/mL  1
磷脂酰肌醇  phosphatidylinositol  0.25  8  ng/mL  0.1
Pimaricin分子式:C33H47NO13分子量:665.73
匹馬霉素
納他霉素   7681-93-8
Pimaricin分子式:C33H47NO13分子量:665.73
匹馬霉素
桿菌肽鋅   1405-89-6
Bacitracin zinc salt分子式:C66H101N17O16SZN分子量:1486.07
Zinc bacitracin
桿菌肽鋅   1405-89-6
Zinc bacitracin
獨(dú)活染料法PCR鑒定試劑盒PBacitracin zinc salt分子式:C66H101N17O16SZN分子量:1486.07
硫酸博來霉素   9041-93-4
Bleomycin sulfate分子式:分子量:
博來霉素,爭光霉素
硫酸博來霉素   9041-93-4
Bleomycin sulfate分子式:分子量:
博來霉素,爭光霉素
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