下列是聯(lián)合固氮菌培養(yǎng)基說明書圖片：
聯(lián)合固氮菌培養(yǎng)基說明書

英文名稱：Combined nitrogen-fixing bacteria medium
產(chǎn)品規(guī)格：250g
產(chǎn)品用途：用于固氮菌的分離培養(yǎng)
產(chǎn)品介紹:
用途：用于聯(lián)合固氮菌的平板計數(shù)。
成分（g/L）
D-葡萄糖酸鈉 5.0g
磷酸二氫鉀 0.4g
磷酸氫二鉀 0.1g
硫酸鎂 0.2g
氯化鈉 0.1g
氯化鈣 0.02g
氯化鐵 0.01g
酵母浸粉 0.8g
鉬酸鈉 0.002g
瓊脂 15.0g
PH值 6.8-7.0
用 法
稱取本品21.6克，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，121℃高壓滅
聯(lián)合固氮菌培養(yǎng)基說明書【實驗方法】
1.產(chǎn)品名稱培養(yǎng)基陽性組：取稀釋后的各試驗菌懸液1ml分別加于預先制備的試管培養(yǎng)基中，每種細菌接種兩支試管。同時分別取1ml菌懸液加于無菌空平皿中，用于計數(shù)，每種細菌做兩個平板。
2. 培養(yǎng)基陰性組：即空白對照，即不添加菌液。
3. 接種量計數(shù)：步驟1中的平皿中，細菌傾注胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基，霉菌和白色念珠菌傾注沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。同時每種培養(yǎng)基做1個空白。
4. 培養(yǎng)條件：
   無菌檢查：20～25℃培養(yǎng)14天或直至出現(xiàn)渾濁（不超過14天）
   MPN計數(shù)：30～35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天
   控制菌檢查：30～35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24小時
   傾注計數(shù)用的的胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基平板置30～35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天
   傾注計數(shù)用的沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板置20～25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3～5天
【操作步驟】
（一）準確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標記劃線，加熱溶解，補充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準備滅菌。
（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死，但細菌的芽胞有較強的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到徹底滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因為蒸汽的穿透力強，殺菌效果好。

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