支原體肉湯培養(yǎng)基說明書
英文名稱:Mycoplasma Broth Medium
產(chǎn)品規(guī)格:250g
產(chǎn)品用途:用于培養(yǎng)支原體的基礎培養(yǎng)基
產(chǎn)品介紹:
用途:用于支原體的分離培養(yǎng)。
用法
稱取本品 27.52g,加熱溶解于 800ml 蒸餾水中,121℃高壓滅菌 15 分鐘,冷至室溫,無菌操作加入 滅活小牛血清或馬血清 200ml 和青霉素 80 萬單位,混勻,分裝無菌試管,備用。
下列是
支原體肉湯培養(yǎng)基說明書圖片:
【操作步驟】
(一)準確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到徹底滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
【實驗方法】
1.產(chǎn)品名稱培養(yǎng)基陽性組:取稀釋后的各試驗菌懸液1ml分別加于預先制備的試管培養(yǎng)基中,每種細菌接種兩支試管。同時分別取1ml菌懸液加于無菌空平皿中,用于計數(shù),每種細菌做兩個平板。
2. 培養(yǎng)基陰性組:即空白對照,即不添加菌液。
3. 接種量計數(shù):步驟1中的平皿中,細菌傾注胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基,霉菌和白色念珠菌傾注沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。同時每種培養(yǎng)基做1個空白。
4. 培養(yǎng)條件:
無菌檢查:20~25℃培養(yǎng)14天或直至出現(xiàn)渾濁(不超過14天)
MPN計數(shù):30~35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天
控制菌檢查:30~35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18~24小時
傾注計數(shù)用的的胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基平板置30~35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天
傾注計數(shù)用的沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板置20~25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3~5天
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支原體肉湯培養(yǎng)基說明書進口/國產(chǎn)3-(氨基)CAS:1075-76-93-(氨基)
進口/國產(chǎn)2,3-二氨基酸酯CAS:107582-20-72,3-二氨基酸酯
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