人抗表皮細(xì)胞基底膜抗體elisa檢測試劑盒試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
人抗表皮細(xì)胞基底膜抗體elisa檢測試劑盒樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
整合素β6(ITGβ6)(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ligustroflavone
正輔因子4(PC4)(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Schaftoside
正輔因子4(PC4)(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 9,10-Dimethoxy-2,3-(methylenedioxy)-13,13a-didehydrob
正輔因子4(PC4)(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Tangeretin
脂蛋白關(guān)聯(lián)磷脂酶A2(LpPLA2)(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR Tangeretin
脂肪酸合酶(FASN)(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Berberine hydrogen sulphate
脂聯(lián)素(ADP)(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Xanthiazone
脂聯(lián)素(ADP)(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Xanthiside
人抗表皮細(xì)胞基底膜抗體elisa檢測試劑盒中性粒細(xì)胞激活蛋白3(NAP3)(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Raddeanoside R8
中性粒細(xì)胞激活蛋白3(NAP3)(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 無
中性粒細(xì)胞激活蛋白3(NAP3)(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Prosapogenin CP6
中性粒細(xì)胞明膠酶關(guān)聯(lián)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Crovatin
中性粒細(xì)胞明膠酶關(guān)聯(lián)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Croverin
腫瘤蛋白p53(TP53)(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 levatin
腫瘤壞死因子α(TNFα)(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Xanthatin鹽酸標(biāo)準(zhǔn)品 Magnesium silicate純度:0.8
蔓荊子黃素標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium L-ascorbate純度:0.985
卡維地標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium pyrophosphate純度:
鹽酸卡替爾標(biāo)準(zhǔn)品 Ammonium bicarbonate純度:0.98
卡芬相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Ammonium chloride純度:0.999
卡芬標(biāo)準(zhǔn)品 Salicylic acid純度:0.991
卡莫司汀相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Chitin純度:0.977
人抗表皮細(xì)胞基底膜抗體elisa檢測試劑盒操作要點:
1)標(biāo)本的采取和保存:可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本;
2)試劑的準(zhǔn)備:所需試劑、蒸餾水、去離子水、自配的緩沖液;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的最后一步溫育反應(yīng),此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。儀器準(zhǔn)備為酶標(biāo)儀。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定。