人皮質(zhì)醇elisa檢測(cè)試劑盒說明書試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
人皮質(zhì)醇elisa檢測(cè)試劑盒說明書樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
人白細(xì)胞共同抗原(LCA/CD45) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR L-Carnitine hydrochloride
人白細(xì)胞彈性蛋白酶(HLE) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR L-Carnitine L-tartrate
人白色念珠菌(C.albicans) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Lead (II) iodide
人白三烯E4(LTE4) 質(zhì)量規(guī)格:BR Lead (II) stearate
人白三烯D4(LTD4) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BC Lead (II) sulfate
人白三烯C4(LTC4) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BC Lead (IV) acetate
人白三烯B4(LTB4) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BC Lead powder
人白介素受體相關(guān)激酶(IRAK) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR Lead(II) carbonate basic
人白介素9(IL-9) 質(zhì)量規(guī)格:BS Leishman's stain
人白介素8(IL-8/CXCL8) 質(zhì)量規(guī)格:>95%(HPLC),BC Leptomycin B 1% soluton
人白介素6(IL-6) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC Lithium 3,5-diiodosalicylate
人白介素-5(IL-5) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Lithium bromide
人白介素4(IL-4) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Lithium metaphosphate
人白介素3(IL-3) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Lithium oxalate
人皮質(zhì)醇elisa檢測(cè)試劑盒說明書人白介素2受體(IL-2R) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Lithium stearate甲磺酸培高利特標(biāo)準(zhǔn)品Rat Thromboxane B2 ELISA Kit純度:0.999
全氟碳標(biāo)準(zhǔn)品Rat Thromboxane B2 ELISA Kit純度:0.996
己酮可可堿標(biāo)準(zhǔn)品Rat TpP ELISA Kit純度:0.999
戊巴比妥標(biāo)準(zhǔn)品Rat TpP ELISA Kit純度:0.96
噴替酸標(biāo)準(zhǔn)品Rat Serum amyloid A ELISA Kit純度:0.975
噴他佐辛標(biāo)準(zhǔn)品Rat Serum amyloid A ELISA Kit純度:0.992
戊烷標(biāo)準(zhǔn)品Rat heme oxygenase-2 ELISA Kit純度:0.995
人皮質(zhì)醇elisa檢測(cè)試劑盒說明書操作要點(diǎn):
1)標(biāo)本的采取和保存:可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本;
2)試劑的準(zhǔn)備:所需試劑、蒸餾水、去離子水、自配的緩沖液;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后?乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,這一保溫過程稱為溫育。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動(dòng)洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的最后一步溫育反應(yīng),此時(shí)酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。儀器準(zhǔn)備為酶標(biāo)儀。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定。