人胎盤核糖核酸抑止劑elisa檢測試劑盒說明書試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
人胎盤核糖核酸抑止劑elisa檢測試劑盒說明書樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
人肌腱蛋白R(shí)(TN-R) 質(zhì)量規(guī)格:>95% (HPLC),BC Urinary trypsin inhibitor fragment
人肌紅蛋白(MYO/MB) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC Zinc oxide
人肌鈣蛋白T(Tn-T) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 4(5)-Methylimidazole
人肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Aluminum hydroxide
人活化素A(ACV-A) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Ammonium phosphate, tribasic , trihydrate
人活化凝血因子Ⅻ(FⅫa) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR Barium carbonate
人活化蛋白C抵抗素(APCR) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Benzamide
人活化蛋白C(APC) 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BS Biebrich scarlet
人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域(MLKL) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Calcium citrate, tetrahydrate
人黃體生成素釋放激素(LHRH) 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,分子生物學(xué)級 Cesium sulfate
人環(huán)磷酰胺(CTX) 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,厚度0.1-0.2cm Copper sheet
人環(huán)磷酸腺苷(cAMP) 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR Copper(I) chloride
人環(huán)磷酸鳥苷(cGMP) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR Copper (I) iodide
人胎盤核糖核酸抑止劑elisa檢測試劑盒說明書人環(huán)加氧酶2(COX-2) 質(zhì)量規(guī)格:>97%,分子生物學(xué)級 dGDP, 2'-Deoxyguanosine-5'-Diphosphate disodium salt
人環(huán)孢素A(CsA) 質(zhì)量規(guī)格:> 98%,BR D-Glucuronic acid, sodium salt, monohydrate二異丙酚標(biāo)準(zhǔn)品Human PIIINT ELISA Kit純度:0.997
丙酸標(biāo)準(zhǔn)品Human Collagen Type III ELISA KIT純度:0.999
鹽酸丙美卡因標(biāo)準(zhǔn)品Human CTX-I ELISA Kit純度:0.998
溴丙胺太林標(biāo)準(zhǔn)品Human gp130 soluble fragment ELISA KIT純度:0.994
普羅帕酮相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品Human Fractalkine ELISA Kit純度:0.983
鹽酸普羅帕酮標(biāo)準(zhǔn)品Human FLT3 ELISA KIT純度:0.991
鹽酸異丙嗪標(biāo)準(zhǔn)品Human Flt-3 ligand ELISA Kit純度:0.992
人胎盤核糖核酸抑止劑elisa檢測試劑盒說明書操作要點(diǎn):
1)標(biāo)本的采取和保存:可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本;
2)試劑的準(zhǔn)備:所需試劑、蒸餾水、去離子水、自配的緩沖液;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后?乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,這一保溫過程稱為溫育。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動(dòng)洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的最后一步溫育反應(yīng),此時(shí)酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。儀器準(zhǔn)備為酶標(biāo)儀。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定。