人神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白elisa檢測(cè)試劑盒試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
人神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白elisa檢測(cè)試劑盒樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
人髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Daidzein
人髓過(guò)氧化物酶(MPO) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR D(-)-allo-Threonine
人酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM) 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR Deoxycorticosterone acetate
人酸性磷酸酶(ACP) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Deoxycorticosterone acetate
人酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子1(aFGF-1) 質(zhì)量規(guī)格:>99% Tetrahydro-L-Biopterin (dihydrochloride)
人松弛肽/松弛素(RLN) 質(zhì)量規(guī)格:>98% Ambrisentan
人絲狀血球凝集素(FHA) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ambrisentan
人絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,鹽酸鹽 Dronedarone HCL
人絲裂原活化蛋白激酶激酶6(MKK6) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Dronedarone
人絲氨酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G(Serpina3g) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR Ranolazine HCl
人神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白elisa檢測(cè)試劑盒人絲氨酸蛋白酶(PRSS) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ranolazine HCl
人絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK) 質(zhì)量規(guī)格:>99% Lercanidipine HCl
人水蛭素(HRD) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 Lercanidipine HCl
人水閘蛋白14(CLDN14) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分 Promethazine Hydrochloride
人水通道蛋白5(AQP-5) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,II晶型 Agomelatine維拉帕米相關(guān)物質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品Human Epinephrine ELISA Kit純度:0.994
維拉帕米相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品Human Neurotrophin-4,NT-4 ELISA kit純度:0.999
維拉帕米相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品Human Neurotrophin-3,NT-3 ELISA KIT純度:0.99
鹽酸維拉帕米標(biāo)準(zhǔn)品Human NT-4 ELISA Kit純度:0.999
鹽酸文拉法辛標(biāo)準(zhǔn)品Human NT-3 ELISA Kit純度:0.998
維庫(kù)溴銨標(biāo)準(zhǔn)品Human NSE ELISA Kit純度:0.98
香蘭素標(biāo)準(zhǔn)品Human neuropeptide Y ELISA Kit純度:0.999
人神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白elisa檢測(cè)試劑盒操作要點(diǎn):
1)標(biāo)本的采取和保存:可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本;
2)試劑的準(zhǔn)備:所需試劑、蒸餾水、去離子水、自配的緩沖液;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后?乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,這一保溫過(guò)程稱為溫育。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動(dòng)洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的最后一步溫育反應(yīng),此時(shí)酶催化無(wú)色的底物生成有色的產(chǎn)物。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。儀器準(zhǔn)備為酶標(biāo)儀。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定。