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背景知識:
新澤西醫(yī)學及牙科大學的蛋白組學研究中心主任Hong Li說:“當我們開始蛋白組學研究時,就采用2D凝膠技術,但得出的信息量卻讓大伙很失望,因為許多蛋白質已經改變了自身的代謝過程。”而基于高度敏感性和精確性的串聯(lián)質譜方法,不需要凝膠,就可以獲得相對和絕對定量的蛋白質結果。定量蛋白組學是蛋白質組學的一個重要組成部分,即對一對基因組表達的全體蛋白或復雜的混合物體系中所有蛋白質進行定量和鑒定。iTRAQ(isobaric tags for relative and absolute quantitation)是美國應用生物系統(tǒng)公司(Applied Biosystems Incorporation,ABI)2004年新開發(fā)的一項蛋白定量技術。iTRAQ技術是一種新的、功能強大的可同時對8種樣品進行絕對和相對定量研究的方法。
技術原理:
iTRAQ標記試劑可以與肽段的N端或賴氨酸側鏈發(fā)生反應,從而完成對肽段的標記。標記完成后混合一個實驗組的所有樣本,一次可同時處理多達8個不同處理的樣本。
在進行一級質譜進行母離子選擇時,來源于不同標記樣本的同一個肽段表現(xiàn)為一個峰,相當于一級質譜強度增強了8倍,有利于鑒定。
在進行二級質譜時,iTRAQ試劑在圖一所示虛線位置斷裂,Balance group發(fā)生中性丟失。Reporter group的強度可反映肽段的相對豐度。
主要應用:
iTRAQ技術應用非常廣泛,它是通過200年開發(fā)的一種新的同位素標記試劑iTRAQ,結合LC/MS技術已被廣泛地應用于細菌、酵母、人體組織、細胞和體液等多種樣本的蛋白質鑒定和定量。作為一種新的定量蛋白質組學研究方法,該技術可同時對4種樣本進行定量分析并展現(xiàn)高通量、重復性好、敏感性高等特點。iTRAQ技術還可以為我們研究前列腺癌的發(fā)生、進展機制,發(fā)現(xiàn)新的生物學標記物提供有力的技術平臺。iTRAQ技術還可以應用與比較野生型酵母菌株和兩種同源突變型酵母菌株xmlv、upflv蛋白質表達差異。同時它可以對多種蛋白混合物或重組的蛋白混合物進行精確地定量。
您只需提供:
新鮮且足量的樣品(組織不少于500 mg,細胞不少于107),或提取的總蛋白(≥ 200 μl)。若提供總蛋白,需滿足iTRAQ質檢要求
我們提供:
差異蛋白信息,生物信息學分析結果,完完整的iTRAQ實驗報告單等。
電話: 020-62816677
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