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熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一門新興的分子細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù),是20世紀(jì)80年代末期在原有的放射性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非放射性原位雜交技術(shù)。目前這項技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于動植物基因組結(jié)構(gòu)研究、染色體精細(xì)結(jié)構(gòu)變異分析、病毒感染分析、人類產(chǎn)前診斷、腫瘤遺傳學(xué)和基因組進(jìn)化研究待許多領(lǐng)域。
FISH的基本原理是用已知的標(biāo)記單鏈核酸為探針,按照堿基互補(bǔ)的原則,與待檢材料中未知的單鏈核酸進(jìn)行異性結(jié)合,形成可被檢測的雜交雙鏈核酸。由于DNA分子在染色體上是沿著染色體縱軸呈線性排列,因而可以探針直接與染色體進(jìn)行雜交從而將特定的基因在染色體上定位。
技術(shù)優(yōu)勢:與傳統(tǒng)的放射性標(biāo)記原位雜交相比,熒光原位雜交具有快速、檢測信號強(qiáng)、雜交特異性高和可以多重染色等特點,因此在分子細(xì)胞遺傳學(xué)領(lǐng)域受到普遍關(guān)注。
FISH 技術(shù)作為連接分子生物學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)的橋梁地位已為世人所公認(rèn)。盡管目前FISH技術(shù)無法達(dá)到100% 完全雜交,特別是在應(yīng)用較短cDNA探針時存在雜交效率明顯下降的問題,但隨著各種新型分子探針以及更為精密高端的光學(xué)顯微鏡和功能強(qiáng)大的計算機(jī)分析系統(tǒng)的不斷問世,上述問題將會逐步得到解決,該技術(shù)的作用正變得日益重要,應(yīng)用領(lǐng)域也得以不斷擴(kuò)展。FISH技術(shù)在泌尿系統(tǒng)腫瘤研究領(lǐng)域的巨大潛力與光明前景將引領(lǐng)我們進(jìn)入全新時代。
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凍存組織,固定/包埋的組織,切片,相關(guān)文獻(xiàn)等;若進(jìn)行細(xì)胞檢測,需進(jìn)行細(xì)胞爬片。
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