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自從Engvall和Perlman(1971)首次報(bào)道建立酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)以來(lái),由于ELISA具有快速、敏感、簡(jiǎn)便、易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn),使其得到迅速的發(fā)展和廣泛應(yīng)用。盡管早期的ELISA由于特異性不夠高而妨礙了其在實(shí)際中應(yīng)用的步伐,但隨著方法的不斷改進(jìn)、材料的不斷更新,尤其是采用基因工程方法制備包被抗原,采用針對(duì)某一抗原表位的單克隆抗體進(jìn)行阻斷ELISA試驗(yàn),都大大提高了ELISA的特異性,加之電腦化程度極高的ELISA檢測(cè)儀的使用,使ELISA更為簡(jiǎn)便實(shí)用和標(biāo)準(zhǔn)化,從而使其成為最廣泛應(yīng)用的檢測(cè)方法之一。
ELISA方法的基本原理是酶分子與抗體或抗原分子共價(jià)結(jié)合,此種結(jié)合不會(huì)改變抗體的免疫學(xué)特性,也不影響酶的生物學(xué)活性。此種酶標(biāo)記抗體可與吸附在固相載體上的抗原或抗體發(fā)生特異性結(jié)合。滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氫體由無(wú)色的還原型變成有色的氧化型,出現(xiàn)顏色反應(yīng)。因此,可通過(guò)底物的顏色反應(yīng)來(lái)判定有無(wú)相應(yīng)的免疫反應(yīng),顏色反應(yīng)的深淺與標(biāo)本中相應(yīng)抗體或抗原的量呈正比。此種顯色反應(yīng)可通過(guò)ELISA檢測(cè)儀進(jìn)行定量測(cè)定,這樣將酶化學(xué)反應(yīng)的敏感性和抗原抗體反應(yīng)的特異性結(jié)合起來(lái),使ELISA方法成為一種既特異又敏感的檢測(cè)方法。
如今ELISA方法已被廣泛應(yīng)用于多種細(xì)菌和病毒等疾病的診斷。在動(dòng)物檢疫方面,ELISA在豬傳染性胃腸炎、牛副結(jié)核病、牛傳染性鼻氣管炎、豬偽狂犬病、藍(lán)舌病等的診斷中已為廣泛采用的標(biāo)準(zhǔn)方法。
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