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| 銷售商： 北京康潤誠業(yè)生物科技有限公司 | 查看該公司所有產(chǎn)品 >> |
StarPure Endo-free Plasmid Maxiprep Kit
| 貨 號 | 規(guī) 格 | 價 格 |
| D203-01 | 10 rxn | 367元 |
StarPure超純質(zhì)粒大量提取試劑盒采用我公司自主創(chuàng)新技術(shù)，通過堿裂解－中和法從培養(yǎng)的細(xì)菌中獲得質(zhì)粒DNA，經(jīng)過幾步重懸、離心沉淀純化質(zhì)粒DNA，徹底清除蛋白質(zhì)、多糖、內(nèi)毒素、RNA和基因組DNA等雜質(zhì)，獲得高純度、高產(chǎn)量的質(zhì)粒DNA。純化的質(zhì)粒DNA OD260/280值通常在1.9左右，可直接應(yīng)用于真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)等對DNA純度要求非常高的工作中。由于本試劑盒不使用離心吸附柱純化，因此基本可回收細(xì)菌裂所解釋放出的全部質(zhì)粒DNA，對質(zhì)粒損傷小，可提取的質(zhì)粒DNA大小不受離心吸附柱的限制，不必?fù)?dān)心質(zhì)粒DNA的丟失。整個純化過程約需3小時。
用途
· 提取用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染的無內(nèi)毒素質(zhì)粒
· 其他分子生物學(xué)應(yīng)用，如酶切、PCR、轉(zhuǎn)化、體外轉(zhuǎn)錄等
· 其他分子生物學(xué)應(yīng)用，如酶切、PCR、轉(zhuǎn)化、體外轉(zhuǎn)錄等
特點(diǎn)
· 高純度：OD260/280值在1.9左右，不含內(nèi)毒素等雜質(zhì)，直接用于轉(zhuǎn)染
· 高產(chǎn)率：基本完全回收細(xì)菌裂解所釋放的質(zhì)粒，不受硅膠膜吸附量的限制；從200 ml菌液中可提取出1.5 mg左右高拷貝質(zhì)粒DNA
·高兼容性：適用于各種大小的質(zhì)粒，包括100 kb以上的大型質(zhì)粒如BAC或PAC質(zhì)粒
· 操作方便：整個純化過程均在Eppendorf管中操作，方法簡單，不需特殊設(shè)備，無需過柱
·高度安全：無需苯酚/氯仿抽提或乙醇沉淀，所用試劑不含任何有毒成分
·批次穩(wěn)定：遵循標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)流程，通過嚴(yán)格質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)
· 高純度：OD260/280值在1.9左右，不含內(nèi)毒素等雜質(zhì)，直接用于轉(zhuǎn)染
· 高產(chǎn)率：基本完全回收細(xì)菌裂解所釋放的質(zhì)粒，不受硅膠膜吸附量的限制；從200 ml菌液中可提取出1.5 mg左右高拷貝質(zhì)粒DNA
·高兼容性：適用于各種大小的質(zhì)粒，包括100 kb以上的大型質(zhì)粒如BAC或PAC質(zhì)粒
· 操作方便：整個純化過程均在Eppendorf管中操作，方法簡單，不需特殊設(shè)備，無需過柱
·高度安全：無需苯酚/氯仿抽提或乙醇沉淀，所用試劑不含任何有毒成分
·批次穩(wěn)定：遵循標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)流程，通過嚴(yán)格質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)
產(chǎn)品組分及保存條件
| 成分 | 總量 | 保存條件 |
| 細(xì)胞懸浮液（Buffer1） | 60 ml | 室溫；加入RNase A后，請于4 ℃保存，有效期一年 |
| 細(xì)胞裂解液（Buffer2） | 110 ml | 室溫；用畢立即蓋緊瓶蓋；如有結(jié)晶析出，可于37 ℃水浴加熱助溶 |
| 中和緩沖液（Buffer3） | 90 ml | 室溫 |
| 雜質(zhì)清除液B（Buffer5） | 5 ml | 室溫；用畢立即蓋緊瓶蓋，防止試劑揮發(fā) |
| 高鹽溶液（Buffer6） | 5 ml | 室溫 |
| TE溶液 | 12 ml | 室溫 |
| RNase A溶液（10mg/ml） | 800 μl | 室溫保存六個月，-20 ℃保存一年 |
質(zhì)量控制
· 從200 ml過夜培養(yǎng)的大腸桿菌DH5a菌液中可提取約1.5 mg pEGFP-N1質(zhì)粒或0.1~0.2 mg低拷貝質(zhì)粒
· 提取的質(zhì)粒OD260/280值在1.9左右，電泳檢測超螺旋結(jié)構(gòu)占90%以上
· 提取的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化HEK-293或HEK-293T細(xì)胞，轉(zhuǎn)染效率在90%以上
· 提取的質(zhì)�？杀怀Ｒ�(guī)限制性內(nèi)切酶完全酶切
· 提取的質(zhì)粒采用BigDye® 終止法測序，可準(zhǔn)確讀取600~800個堿基
使用方法
應(yīng)用實(shí)例
操作流程
1．按照StarPure Plasmid Maxiprep Kit的說明書，從200 ml 過夜培養(yǎng)的大腸桿菌菌液中提取pEGFP-N1質(zhì)粒。
2．分光光度計(jì)檢測：質(zhì)�？偭�=1.5 mg，OD260/280=1.91。
3．按照StarFect High-efficiency Transfection Reagen（t Cat. No. C101-01）的說明書，使用2 μg 提取的pEGFP-N1質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HEK-293T細(xì)胞（以六孔板為例）。
4．轉(zhuǎn)染24小時后熒光顯微鏡下檢測轉(zhuǎn)染效果（見下圖）。
StarPure Plasmid Maxiprep Kit 制備的
pEGFP-N1質(zhì)�？筛咝мD(zhuǎn)染真核細(xì)胞。
手機(jī)版：去內(nèi)毒素超純質(zhì)粒大量提取試劑盒（溶劑型）
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