圖 1. SPR 技術(shù)發(fā)展歷程。
發(fā)展至今,SPR 已成為生命科學(xué)研究領(lǐng)域不可或缺的研究工具。
圖 2. SPR 原理圖。
原理:當(dāng)光源發(fā)出的偏振光以一定的角度入射到棱鏡中,在棱鏡與金屬的界面處發(fā)生全反射,而光會在金屬表面介質(zhì)中傳輸振幅呈指數(shù)衰減的倏逝波,同時引發(fā)金屬表面的自由電子產(chǎn)生表面等離子波,等離子波與倏逝波發(fā)生共振時,其反射光強(qiáng)度會大幅度地減弱。反射光強(qiáng)度最低時的暗帶所對應(yīng)反射角即為共振角。當(dāng)有生物分子與金屬表面的薄膜結(jié)合或與已吸附的分子相互作用時,這種等離子體波的特性會發(fā)生變化,導(dǎo)致共振角度發(fā)生偏移 (從 A 到 AB 的偏移)[10]。
這種偏移可通過檢測入射光的反射角度變化來實現(xiàn)。借助 SPR 儀器的檢測系統(tǒng),可以實時、定量地測量共振角度的變化,從而得到親和力相關(guān)信息。
目前常用的檢測分子間相互作用力的主流方法分為 4 種:表面等離子共振 (SPR)、拉下實驗 (GST pull-down)、免疫共沉淀 (IP)、酶聯(lián)免疫吸附實驗 (ELISA)。其中,SPR 技術(shù)是生命科學(xué)基礎(chǔ)研究、藥物研發(fā)與醫(yī)學(xué)診斷分析領(lǐng)域動力學(xué)及親和力分析的檢測方法,也是檢測生物分子相互作用的 “金標(biāo)準(zhǔn)”。
▐ SPR 檢測有什么特點?
自 Liedberg[5][6] 等人于 1983 年首次運用 SPR 技術(shù)進(jìn)行抗原抗體相互作用分析以來,SPR 技術(shù)已廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)生命科學(xué)、制藥、食品及環(huán)境科學(xué)等領(lǐng)域。近幾年,新的技術(shù)理論和方法學(xué)的發(fā)展又推動了 SPR 技術(shù)向小分子的相互作用研究、藥物篩選、臨床診斷、蛋白質(zhì)組學(xué)等新興的應(yīng)用領(lǐng)域不斷擴(kuò)展。目前,SPR 技術(shù)在科學(xué)研究中發(fā)揮出越來越重要的作用。
▐ 我們將為您提供哪些服務(wù)?
近日,SPR檢測服務(wù)強(qiáng)勢上線,MCE 使用 Biacore T200 儀器,可以進(jìn)行抗原-抗體、蛋白-蛋白、抗體-受體、VLP 蛋白-抗體、蛋白-小分子化合物等的親和力分析,為客戶提供定制的多樣性服務(wù)。【案例 2】通過 SPR 技術(shù),使用 Biacore 儀器測定不同濃度下 Human TGFBR1 蛋白與 Mature TGF beta 1 蛋白的親和力。利用 T200 的分析軟件,采用 1:1 binding 的分析模式對其結(jié)合和解離進(jìn)行分析,其親和力常數(shù)為 0.12 uM。
【案例 1】
通過 SPR 技術(shù),使用 Biacore 儀器測定不同濃度下 Human Claudin18.2 VLP 蛋白與 Anti-Claudin18.2 Antibody 抗體的親和力。利用 T200 的分析軟件,采用 1:1 binding 的分析模式對其結(jié)合和解離進(jìn)行分析,其親和力常數(shù)為 1.01 nM。【案例 2】通過 SPR 技術(shù),使用 Biacore 儀器測定不同濃度下 Human Claudin 6 VLP 蛋白與 Anti-Claudin 6 Antibody 抗體的親和力。利用 T200 的分析軟件,采用 1:1 binding 的分析模式對其結(jié)合和解離進(jìn)行分析,其親和力常數(shù)為 0.19 nM。
MCE 致力于為科研機(jī)構(gòu)、醫(yī)藥機(jī)構(gòu)、工業(yè)企業(yè)和創(chuàng)新團(tuán)隊提供 SPR 檢測技術(shù)服務(wù),如有任何疑問或需求,歡迎隨時與我們聯(lián)系。我們的專家團(tuán)隊將全力支持您的研究項目,助您取得更大的突破和成功。
想要了解更多關(guān)于 SPR 檢測技術(shù)的信息,或是預(yù)約我們的服務(wù),請關(guān)注我們的公眾號,發(fā)郵件至 sales@MedChemExpress.cn 或直接聯(lián)系 MCE 的銷售人員。我們的專業(yè)團(tuán)隊將竭誠為您服務(wù),為您量身打造 SPR 檢測服務(wù)!
EGFR Protein, Human (HEK293, His) EGFR 是受體酪氨酸激酶中的表皮生長因子受體(HER)家族中的一員,是一類重要的跨膜受體。在細(xì)胞生理過程中發(fā)揮增殖和抗凋亡等重要作用。
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AXL Protein, Human (HEK293, His) AXL 是一種受體酪氨酸激酶,負(fù)責(zé)介導(dǎo) PI3K 等信號通路的細(xì)胞外信號向胞內(nèi)的轉(zhuǎn)導(dǎo),廣泛參與調(diào)節(jié)細(xì)胞的生存、增殖、遷移與分化。 |
BMP-4 Protein, Human (E. coli,His) BMP-4 是一種多效性配體蛋白,屬于 TGFβ 家族,參與血管系統(tǒng)循環(huán),可以激活血管細(xì)胞上的受體。 |
Fc gamma RIIA/CD32a Protein, Human (HEK293, His) CD32,也稱為 FcγRII 或 FCGR2,是屬于 Ig 基因超家族的表面受體糖蛋白。CD32 在細(xì)胞反應(yīng)調(diào)節(jié)和免疫復(fù)合物的吸收具有重要作用。 |
FcRH5/FcRL5 Protein, Human (HEK293, C-His) Fc受體樣蛋白5是在人中由 FCRL5 基因編碼的蛋白。 |