酷搏科技推出q900系列384孔高通量熒光定量PCR系統(tǒng)
瀏覽次數(shù):1705 發(fā)布日期:2023-8-3
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96孔熒光定量PCR儀已成為分子生物學(xué)實驗室的必備工具,但對于基因表達(dá)分析、基因分型研究(SNP/CNV)、病原體檢測、核酸藥物開發(fā)、測序文庫定量、作物育種等細(xì)分領(lǐng)域,依然存在更高通量的熒光定量檢測需求。
為此,酷搏科技于2023年夏天推出全新產(chǎn)品——Quantagene q900系列384孔熒光定量PCR系統(tǒng),以更全面的功能、更快速的檢測、更準(zhǔn)確的定量結(jié)果助力用戶更高效的實驗室研究。
產(chǎn)品特點
一臺優(yōu)秀的熒光定量PCR儀,需要在運行快速、操作簡便的基礎(chǔ)上最大程度實現(xiàn)每個反應(yīng)孔溫度、光學(xué)性能的一致,從而得到準(zhǔn)確的檢測結(jié)果。
為了實現(xiàn)這一目標(biāo),q900的熱循環(huán)系統(tǒng)設(shè)計了3組獨立輸出的Peltier模塊,分別對加熱模塊的 3個區(qū)域獨立控制,確保不同區(qū)域間的溫度均一性。
反應(yīng)體積5µl,全部384孔使用完全一致的反應(yīng)溶液時Tm值的分布。圖中Tm最大與最小值之差為0.18°C,Tm平均值為80.52°C。
另一方面,q900 采用獨特的雙重反射靜態(tài)光學(xué)模組陣列技術(shù)。每個光學(xué)通道配置獨立的長壽命 LED光源、濾光片組和CMOS相機(jī),雙重反射的設(shè)計在小體積的機(jī)身中延長光路,降低孔板中心和邊緣的熒光信號差異。
左:在q900MX上使用四種探針(藍(lán)色:FAM,綠色:HEX,黃色:ROX,紅色:Cy5)分別進(jìn)行7個濃度10個梯度稀釋(n=6)的一步法四重RT-qPCR實驗。右:雙重反射靜態(tài)光學(xué)模組陣列結(jié)構(gòu)示意圖。
性能展示
優(yōu)秀的384孔整板Ct一致性
得益于均一的熱循環(huán)系統(tǒng)和穩(wěn)定的光學(xué)系統(tǒng),q900可以輕松實現(xiàn)整板Ct標(biāo)準(zhǔn)差小于0.05,有效消除邊緣效應(yīng),在任何孔位進(jìn)行實驗都可以獲得相同的準(zhǔn)確結(jié)果。
|
實驗一 |
實驗二 |
實驗三 |
儀器編號 |
1 |
2 |
3 |
Ct平均值 |
17.775 |
17.783 |
17.580 |
Ct 標(biāo)準(zhǔn)差 |
0.022 |
0.020 |
0.031 |
Ct CV |
0.12% |
0.11% |
0.18% |
使用q900進(jìn)行整板實驗的全384孔歸一化擴(kuò)增曲線圖及Ct值附近局部放大圖
大范圍濃度精準(zhǔn)定量
q900可以在100-1010拷貝/反應(yīng)范圍內(nèi)進(jìn)行定量檢測,穩(wěn)定均一的溫控系統(tǒng)確保全濃度范圍高效擴(kuò)增,為文庫定量、基因表達(dá)定量等應(yīng)用提供更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)結(jié)果。
儀器型號 |
q225 |
q900 |
擴(kuò)增效率 |
100.1% |
100.1% |
R2 |
0.9996 |
0.9996 |
使用q225及q900進(jìn)行連續(xù)2倍梯度稀釋實驗,反應(yīng)體積5 μl,每一濃度三個平行反應(yīng)。在Ct值為4-30的區(qū)間范圍內(nèi),q900均可以進(jìn)行準(zhǔn)確定量,且結(jié)果與q225實驗結(jié)果高度一致。
1-25μl反應(yīng)體積均可適配
考慮到操作方便性,q900推薦反應(yīng)體積為5-10μl。而對于樣本或試劑較為珍貴的情況,在q900上使用低至1μl的反應(yīng)體系,依然可以獲得相同準(zhǔn)確性的測試結(jié)果,配合擬合算法計算Ct值,使得相同反應(yīng)體系在不同反應(yīng)體積下可以獲得完全一致的Ct結(jié)果。
反應(yīng)體積 |
Ct平均值 |
Ct標(biāo)準(zhǔn)差 |
20μl |
17.918 |
0.050 |
10μl |
17.915 |
0.007 |
5μl |
17.933 |
0.009 |
2μl |
17.939 |
0.027 |
1μl |
17.954 |
0.026 |