A:從基因沉默的角度看，siRNA似乎可以取代反義核酸，因?yàn)閟iRNA的效率更高。不過還不能說完全取代，首先siRNA是雙鏈的，成本也相應(yīng)高一些，需要給藥系統(tǒng)，對于肝臟可能問題不大，對肝外還是會有一些問題存在。就這個角度，反義核酸給藥系統(tǒng)要求沒有那么高，相對比較穩(wěn)定，對于腔內(nèi)注射反義核酸的效果是比較好的。從剪切和調(diào)控機(jī)制siRNA明顯是可以取代反應(yīng)核酸的，另外基因沉默靶點(diǎn)這塊可以考慮用siRNA取代反義核酸可以達(dá)到更好的效果。

A:mRNA的特點(diǎn)是表達(dá)后的蛋白可以用于基因編輯、CAR-T或者疫苗。siRNA主要用來封閉基因，它們都有不同的重點(diǎn)用途。不過mRNA需要納米遞導(dǎo)，不包封沒有足夠的穩(wěn)定性，并且有復(fù)雜的專利覆蓋和成本及技術(shù)上的挑戰(zhàn)。siRNA因?yàn)槭侨�合成，很容易生產(chǎn)，操作性更強(qiáng)，也沒有專利覆蓋，所以兩者發(fā)展前景目前很難說。

A:產(chǎn)品優(yōu)勢主要在于通過提升內(nèi)含體的逃逸水平。傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染試劑可通過表面正電荷幫助siRNA大量攝取入胞，但入胞后siRNA內(nèi)含體逃逸水平低，造成攝取的siRNA無法發(fā)揮作用，同時造成細(xì)胞毒性。本品為非強(qiáng)正電型脂質(zhì)轉(zhuǎn)染試劑，避免細(xì)胞大量攝取造成的毒性，但本品可提升細(xì)胞內(nèi)吞后的siRNA內(nèi)含體逃逸效率，通過促進(jìn)內(nèi)含體逃逸使更多siRNA釋放入細(xì)胞質(zhì)中實(shí)現(xiàn)高效基因沉默作用。故在細(xì)胞水平上通過熒光標(biāo)記siRNA進(jìn)行條件優(yōu)化的方法不適用于本轉(zhuǎn)染試劑。推薦使用Western Blot或QPCR方式對最佳轉(zhuǎn)染濃度進(jìn)行優(yōu)化。

A:產(chǎn)品組分有A液和B液，將siRNA配液放入EP管，加入A液混合均勻，再加入B液混合均勻，室溫下放置5分鐘，再加入相應(yīng)的培養(yǎng)基到孔板即可。詳見產(chǎn)品說明書。

A: 建議用量

注：使用本轉(zhuǎn)染試劑對細(xì)胞進(jìn)行siRNA轉(zhuǎn)染時，為了獲得最佳基因沉默效果，每一種細(xì)胞系轉(zhuǎn)染siRNA的劑量都需要經(jīng)過實(shí)驗(yàn)確定最佳范圍。