CRISPR的誕生，是繼RNA干擾技術、高通量測序技術等之后生物科學發(fā)展歷史上最具顛覆性技術之一，使用高效、迅速且簡單，在生物醫(yī)學研究領域及臨床實踐中引起一場巨變。2012年，Jennifer Doudna和Emmanulle Charpentier在Science 雜志發(fā)文成功解析了CRISPR/Cas9基因編輯的工作原理，基于此論文，在過去的7年中CRISPR技術斬獲了各種重量級獎項，包括生命科學突破獎，蓋爾德納國際獎，阿爾珀特獎，沃爾夫獎等，并最終成功獲得2020年諾貝爾化學獎。

華人科學家張鋒在 Science 雜志發(fā)表論文，首次將CRISPR/Cas9基因編輯技術應用于哺乳動物和人類細胞。并且最近也贏得了真核細胞 CRISPR-Cas9基因編輯技術的專利權之爭。

    至此，這把“基因剪刀”，讓科學家如虎添翼。

    經(jīng)過近幾年的發(fā)展，CRISPR不僅成為了生物醫(yī)學研究實驗室的常規(guī)研究技術，也已經(jīng)成功用于臨床治療和診斷，例如近期發(fā)表的啟動于2016年的全世界第一個CRISPR基因編輯T細胞治療腫瘤的臨床實驗證明安全可靠；此外，基于 CRISPR的快速診斷技術在最近暴發(fā)的冠狀病毒流感快速檢測中大放異彩。

    CRISPR技術正被越來越多的研究人員用來改造人類基因以消除疾病，創(chuàng)造生命力更加頑強的植物，消滅病原體等。CRISPR技術不僅能夠在不同物種中對特定的基因進行敲除，敲入等，經(jīng)過改造后還能在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控基因的表達或者沉默、對特定的基因進行原位標記、在細胞水平或體內(nèi)對單堿基進行編輯（BE2，BE3，ABE等）、體外系統(tǒng)中用于病原微生物或者基因突變的檢測等（Sherlock、DETECTR）；此外，通過與慢病毒或AAV技術聯(lián)合可以輕松在全基因組水平進行基因快速篩選，David Liu研究小組與2019年實現(xiàn)了無模板的基因敲入技術。

     隨著研究的深入，CRISPR/Cas9系統(tǒng)的應用更加便捷、高效，也更廣泛，目前該技術成功應用于人類細胞、斑馬魚、小鼠以及細菌等基因組精確修飾，成為科研人員的強大工具，基于CRISPR臨床實驗已經(jīng)取得初步成功。為了讓更多的科研人員及時全面的掌握CRISPR最新技術，獲得基因編輯質(zhì)粒系統(tǒng)。特于2020年10月31日至11月1日在北京理工大學國際教育交流中心（海淀區(qū)北三環(huán)西路66號）舉辦CRISPR/Cas9基因靶向修飾技術培訓班。在帶教教師的指導下，學員獨立完成一系列全部實驗。

課程福利
所有參加培訓的老師均可獲得：
1. 贈送無縫克隆試劑盒以及免費基因編輯質(zhì)粒載體一份：可以用于哺乳動物、植物、真菌、細菌、斑馬魚、線蟲等，共60余種）。
2. 免費贈送sgRNA離線設計軟件（有基因組DNA序列即可設計！）。
3. 分子生物學免費軟件安裝包一套（snapgene，premier6，Graphpad6.01，億圖圖示專家-技術路線圖繪制，Endnote，F(xiàn)lowjo等）。
4. 免費獲得信號通路圖制作神器- Biomedical-PPT-Toolkit-Suite。
 

日期	時間	培訓內(nèi)容	授課老師
10月30日	13:00-18:00	培訓報到	劉波博士 2008年博士畢業(yè)于中國科學院上海生命科學研究院，從事腫瘤干細胞，細胞衰老，腫瘤轉(zhuǎn)移等細胞作用網(wǎng)絡和通路的研究，并作為骨干研究人員參加了973計劃項目、國家自然科學基金重點項目、在香港中文大學做為作為Postdoc和Research fellow，從事研究工作。先后Nature Genetics，cell research、PLOS one等期刊發(fā)表論文十余篇。
10月31日	9:00-11:30	理論講解： 一、基因編輯技術簡介（三代基因編輯工具） 1. ZFN 2.TALEN 3.CRISPR 二、CRISPR/Cas9基因編輯技術原理 1. CRISPR/Cas9發(fā)現(xiàn)歷史 2. CRISPR/Cas9作用機制解析 3. CRISPR/Cas9系統(tǒng)改造策略
	13:00-17:00	理論講解： 一、sgRNA在線設計構(gòu)建實戰(zhàn)演練(1.靶基因序列查找2.sgRNA在線設計合成)  二、CRISPR/Cas9轉(zhuǎn)染策略: 1.生物轉(zhuǎn)染（慢病毒、腺相關病毒等） 2.物理轉(zhuǎn)染 （電轉(zhuǎn)核酸/RNP、顯微注射、基因槍） 3.化學轉(zhuǎn)染 （脂質(zhì)體、陽離子聚合物） 三、CRISPR/Cas9 sgRNA效率檢測，脫靶檢測及解決策略 1.高保真Cas9（espCas9、Hifi-Cas9、Cluster1-Cas9）
11月01日	9:00-11:30	理論講解： 一、CRISPR技術應用解析 1.基因敲除（單基因敲除、多基因敲除、大片段刪除、多靶點sgRNA載體構(gòu)建策略） 2.基因敲入實戰(zhàn)演練（gRNA選擇、同源臂設計、導入，長片段導入策略/提高基因敲入效率策略，PITCh、HITI、CRISPR-轉(zhuǎn)座酶高效基因敲入系統(tǒng)） 3.CRISPR在轉(zhuǎn)錄調(diào)控中的應用（轉(zhuǎn)錄激活、轉(zhuǎn)錄抑制系統(tǒng)） 4.CRISPR靶基因標記定位 二、CRISPR案例解析 1.基因敲除在小鼠模型構(gòu)建、植物、細胞、細菌、真菌等中的應用案例解析 2.基于CRISPR的全基因組基因敲除高通量篩選策略（文庫構(gòu)建，選擇，流程優(yōu)化等） 3.基于CRISPR的全基因組轉(zhuǎn)錄激活/抑制高通量篩選策略（文庫構(gòu)建，選擇，流程優(yōu)化等） 三、CRISPR/Cas9與基因沉默技術（siRNA、shRNA）系統(tǒng)比較。
	13:00-17:00	理論講解： 一、單堿基基因編輯技術簡介及在基因治療中的應用 1.HF2-BE2 2.BE3系統(tǒng) 3.ABE系統(tǒng)4.單堿基基因編輯脫靶克服。 二、基因CRISPR的基因檢測系統(tǒng) 1、CRISPR-Cas12a系統(tǒng)介紹(DETECTR) 2、CRISPR-Cas13a系統(tǒng)介紹(SHERLOCK-多重病原菌檢測) 三、CRISPR/Cas9系統(tǒng)在腫瘤和遺傳病治療中應用解析 1、CRISPR結(jié)合免疫檢查點抑制劑治療腫瘤 2、單基因遺傳病治療（DMD、先天性黑朦、地中海貧血等） 3、CRISPR治療HIV-基因編輯嬰兒解析 4、CRISPR治療HIV炎性白血病病例解析 四、新一代無模板基因敲入系統(tǒng)解析 1、CRISPR Primer-editing 基因敲入原理及應用

 

實驗課安排在公司自建實驗室進行，課程當天安排專車接送。

日期	時間	培訓內(nèi)容
11月02日	9:00-11:30	實驗操作： 一、CRISPR/Cas9敲除質(zhì)粒轉(zhuǎn)染靶細胞 二、CRISPR/Cas9基因表達載體克隆構(gòu)建 1.sgRNA設計合成 2.敲除載體選擇及線性化 3.sgRNA連接，轉(zhuǎn)化等
	13:00-17:00	實驗操作： 1.CRISPR/Cas9轉(zhuǎn)染后靶DNA檢測 2.靶基因修飾位點擴增及鑒定 3. CRISPR基因敲除效果檢測

 

舉辦地點
北京理工大學國際教育交流中心
參加對象
從事醫(yī)學、生命科學、農(nóng)學等領域科研工作者和高校教師及研究生。
授課方式
理論講授和實際演練緊密結(jié)合。
收費標準
注冊費：理論授課 3500元/人（培訓提供免費午餐），2020年10月26號之前匯款報名可以優(yōu)惠至：3300元/人。實驗操作課程需加800元/人，同一個單位三個人以上報名可以免費構(gòu)建價值1500元的質(zhì)粒一個。
 
推薦酒店地點：（住宿費用自理）
北京理工大學國際教育交流中心360元/標間。
如家快捷酒店(北京蘇州橋人民大學店) 365元/大床，390/標間。
 
銀行匯款
北京微旋基因技術有限公司
開戶行：中國建設銀行北京宣武支行
賬  號：11001019500053058529
備  注：銀行轉(zhuǎn)賬的學員，請于匯款單備注欄內(nèi)注明參會人姓名
聯(lián)系人
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