百螢生物夏促來襲，D-熒光素鉀鹽及熒光素酶檢測試劑盒七折出售（僅終端用戶），活動時(shí)間：2020.8.1至2020.8.31。需要購買的小伙伴不要錯過哦！

 

最常見的報(bào)告基因是北美螢火蟲photinus pyralis的熒光素酶。該蛋白質(zhì)不需要翻譯后修飾即可獲得酶活性。高濃度下（體內(nèi)）甚至沒有毒性，可用于原核和真核細(xì)胞。

 

圖1.在帶有NOVOstar酶標(biāo)儀（BMG Labtech）的白色96孔板中，使用Amplite 螢光素酶報(bào)告基因基因檢測試劑盒測量了螢光素酶劑量反應(yīng)。該試劑盒可在20分鐘至5小時(shí)的孵育時(shí)間內(nèi)檢測到低至0.1pg /孔的螢光素酶，而不會丟失信號強(qiáng)度。

 

Amplite 螢光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒使用無DTT配方來定量活細(xì)胞和細(xì)胞提取物中的螢光素酶活性。該檢測基于螢火蟲熒光素酶，螢火蟲熒光素酶是一種單體的61 kD酶，可催化熒光素的兩步氧化，并在560 nm處產(chǎn)生高度熒光。試劑盒包含所有基本成分，并具有與HTS兼容優(yōu)化的“混合讀取”模式。它們具有高靈敏度，可用于需要低檢測限的測定。該試劑盒具有用于研究基因調(diào)控和功能的快速、簡單且均一的生物發(fā)光測定法。

 

近年來，其他熒光素酶（例如高斯熒光素酶）的使用有所增加，因?yàn)檫@些報(bào)告基因較小，并且不需要ATP的存在。高斯熒光素酶是一種20 kD的蛋白質(zhì)，可通過氧氣催化腔腸素氧化，產(chǎn)生熒光。源自海洋co足類高斯氏菌的生物發(fā)光酶在表達(dá)后可有效地從哺乳動物細(xì)胞中分泌出來。

 

圖2.用Amplite 高斯熒光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒（藍(lán)線）和市售的高斯熒光素酶檢測試劑盒（紅線）在帶有NOVOstar酶標(biāo)儀（BMG Labtech）的白色96孔板中檢測了分泌的高斯熒光素酶。

 

Amplite 高斯熒光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒使用專有的發(fā)光配方來定量細(xì)胞培養(yǎng)基中的熒光素酶活性。當(dāng)與高斯熒光素酶相互作用時(shí)，該發(fā)光產(chǎn)物會產(chǎn)生非常強(qiáng)的熒光光。該試劑盒提供了與HTS兼容的所有基本組件。它們具有很高的靈敏度，可以在96孔和384孔微量滴定板上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。該測定法與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長培養(yǎng)基兼容。

 

海腎螢光素酶

海腎螢光素酶是一種從Renilla reniformis分離的36 kDa蛋白。與螢火蟲熒光素酶相比，海腎熒光素酶的底物和輔因子要求不同。海腎熒光素酶在氧氣存在下使用腔腸素，產(chǎn)生480 nm的藍(lán)光。與螢火蟲螢光素酶類似，海腎螢光素酶因其底物要求和光輸出的差異而可用于雙重報(bào)告檢測。

 

圖3.用Amplite Renilla熒光素酶報(bào)告基因基因檢測試劑盒在白色的96孔板中用NOVOstar酶標(biāo)儀（BMG Labtech）檢測了Renilla熒光素酶

 

Amplite 海腎螢光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒提供了一種快速，靈敏的方法，可以使用專有的發(fā)光配方在基于細(xì)胞的檢測中檢測海腎螢光素酶的活性。與海腎熒光素酶相互作用后，該試劑會產(chǎn)生具有強(qiáng)發(fā)光的產(chǎn)物。該測定法與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長培養(yǎng)基兼容。該試劑盒可測量野生型和合成hRluc基因的原始表達(dá)或基因表達(dá)。可以在96孔和384孔微量滴定板形式進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

 

 

 

 

百螢生物八月促銷第二彈：CCK-8檢測試劑盒五折出售（僅終端用戶），活動時(shí)間：即日起-2020.9.30。拿起您手中的電話，快來訂購吧！

 

Cell Counting Kit-8 (CCK-8)是一種基于 SST-8 的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。其主要成分為水溶性四唑鹽 WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)。

 

圖1.用CCK-8檢測試劑盒確定細(xì)胞數(shù)。 將0至100,000個細(xì)胞/孔/ 100 µL的Jurkat細(xì)胞添加到一個透明96孔板中。使用SpectraMax酶標(biāo)儀（Molecular Devices）在460nm處測量吸光度。

 

WST-8 是一種類似于 MTT 的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的水溶性的甲臜（formazan)。WST-8 被細(xì)胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的甲臜能夠直接溶解在培養(yǎng)基中。細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺;顏色的深淺與細(xì)胞的增殖成正比，與細(xì)胞毒性成反比。使用酶標(biāo)儀在450mM波長處測定OD值，間接反映活細(xì)胞數(shù)量。對于同樣的細(xì)胞，顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān)系。MTT 具有毒性，同時(shí)其生成的甲臜需要有機(jī)溶劑溶解，會對操作人員身體造成危害。本試劑無毒，使用中無需有機(jī)溶劑，操作更加安全。