Bertin Coriolis助力多種氣傳真菌超快速檢測

瀏覽次數(shù)：6643　發(fā)布日期：2019-5-14　來源：本站　本站原創(chuàng)，轉(zhuǎn)載請注明出處

今年3月份Bertin Coriolis推出了使用Coriolis MICRO空氣采樣器結(jié)合基于基因芯片技術(shù)的多重PCR檢測的解決方案，極大地推動了檢測多種氣傳真菌種類的超快速檢測系統(tǒng)的發(fā)展

氣傳真菌能夠引起一些生物腐蝕和健康問題。為了避免這些損害，在一些室內(nèi)環(huán)境例如工廠、博物館和其他一些公共場所檢測真菌菌落就顯得額外重要。然而目前常規(guī)的一些檢測真菌的方法需要一個培養(yǎng)的過程。

有研究報道Coriolis® µ有足夠收集能力，通過PCR擴(kuò)增后，可以有效檢測單一真菌物種，而且不需要培養(yǎng)的過程。

本次應(yīng)用中，我們評估了一個超快速檢測系統(tǒng)，由基于基因芯片技術(shù)的多重PCR檢測系統(tǒng)GENOGATE和Coriolis® µ空氣采樣器組成，用來檢測氣傳真菌。

本次應(yīng)用的實驗材料包括：Coriolis® µ空氣采樣器，無菌錐形管，15ml收集液體（Bertin公司）；基于基因芯片技術(shù)的多重PCR檢測系統(tǒng)GENOGATE（Toyo Seikan公司）。

本次應(yīng)用的實驗過程如下圖所示：

1.使用Coriolis® µ空氣采樣器收集包括真菌孢子的微粒；

2.篩選真菌孢子并提取DNA；

3.熒光標(biāo)記；

4.使用通用引物進(jìn)行多重PCR擴(kuò)增；

5.使用相同的引物對第一輪PCR處理的樣品再一次進(jìn)行多重PCR擴(kuò)增；

6.熒光檢測分析目的基因。
通過與ITS序列分析獲得已知的結(jié)果對比，來驗證本次應(yīng)用中這個超快速檢測系統(tǒng)的性能，實驗結(jié)果如下：表1為分析基因芯片技術(shù)的檢測下限，兩輪PCR都檢測到了不同種類的真菌；表2對比分析了兩種方法，第一種為用Coriolis® µ空氣采樣器，用多重PCR分析；第二種為使用air IDEAL采集器收集培養(yǎng)的真菌菌落，然后用ITS序列分析結(jié)果。結(jié)果顯示兩種方法都檢測到了不同種類的真菌，而使用Coriolis® µ和基因芯片分析的方法檢測到的菌落形成單位都要遠(yuǎn)高于第二種方法，分別為750cfu/62cfu和469cfu/79cfu；使用Coriolis® µ的空氣流速的最高可達(dá)300L/min，air IDEAL僅100L/min。使用Coriolis® µ空氣采樣器和基因芯片技術(shù)的超快速檢測系統(tǒng)，不需要培養(yǎng)過程，成功檢測到不同種類的氣傳真菌。
即使在嚴(yán)重污染的環(huán)境下，結(jié)合Coriolis® µ空氣采樣器和GENOGATE（多重PCR平臺）可以有效地分析不同種類的氣傳真菌。這個系統(tǒng)在評估環(huán)境污染、特殊有害真菌檢測、早期發(fā)現(xiàn)室內(nèi)環(huán)境變化方面是一個有效的工具，當(dāng)然這個系統(tǒng)也同樣應(yīng)用于化妝品、食品、飲品行業(yè)以及學(xué)術(shù)研究領(lǐng)域。