德國ChromoTek公司成立于2008年，致力于細(xì)胞生物學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)的研發(fā)與研究，公司擁有強(qiáng)大的研發(fā)團(tuán)隊(duì)，有先進(jìn)的生物制劑，主要主要使命是花費(fèi)較少的時(shí)間和成本，使客戶獲得得高質(zhì)量的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

 

德國ChromoTek公司 聯(lián)合中國專業(yè)的生物技術(shù)服務(wù)提供商－BioTNT,針對(duì)中國市場(chǎng)的實(shí)際情況，推出全世界最可靠的GFP 相關(guān)產(chǎn)品。

 

 

一、Nano-Trap系列；以產(chǎn)品結(jié)合物為標(biāo)準(zhǔn)，包含磁珠系列和瓊脂糖珠子系列，還有96板系列；抗體結(jié)合物包括GFP Trap，RFP Trap，GST Trap，Dnmt1-Trap；Mk2-Trap；P53-Trap；Mdm4/ HdmX-Trap

二、 Booster系列；含GFP booster RFP booster；

三、 可用于HCA 實(shí)驗(yàn)的Chromobodies(質(zhì)�；蚣�(xì)胞系形式)；

四、  高品質(zhì)抗體（標(biāo)簽蛋白抗體和普通抗體）；

 

產(chǎn)品一：

GFP-Trap?  —— 值得信賴的科研工具：

Nano-Trap：與agarose beads或者magnetic beads結(jié)合，在免疫沉淀或蛋白質(zhì)相互作用的實(shí)驗(yàn)中，可高效抓取或純化GFP或RPF融合蛋白。 （優(yōu)點(diǎn)：三好三多）

優(yōu)點(diǎn)一：抗體好---------Nano-Traps采用的抗體是基于alpaca的單域抗體片段（VHHS）；具有分子量�。�15Kda）、極端穩(wěn)定（70℃仍保持穩(wěn)定），高親和力（高特異性性結(jié)合GFP蛋白），無普通抗體輕鏈與重鏈污染等一系列優(yōu)點(diǎn)等優(yōu)點(diǎn)；GFP抗體可以特異性結(jié)合綠色熒光蛋白的衍生物，如eGFP, wtGFP, GFP S65T，TagGFP，不與RFP衍生蛋白結(jié)合。

優(yōu)點(diǎn)二：形式好-------抗體結(jié)合了agarose beads（瓊脂糖珠子）或者magnetic beads（磁珠），在IP實(shí)驗(yàn)，COIP ，pulldown，Chip實(shí)驗(yàn)中可以直接取代特異性GFP 抗體+proteinA/G 瓊脂糖珠子；

優(yōu)點(diǎn)三：效果好------孵化時(shí)間短（只需5-30min），能夠更好與結(jié)合，從細(xì)胞提取物或細(xì)胞器中定量分離GFP融合蛋白及結(jié)合因子

優(yōu)點(diǎn)四：實(shí)驗(yàn)應(yīng)用多：被廣泛用于免疫沉淀、質(zhì)譜分析、酶活測(cè)定、生物大分子相互作用/親和力實(shí)驗(yàn)、染色質(zhì)免疫沉淀（ChIP）、蛋白質(zhì)相互作用分析；

優(yōu)點(diǎn)五：產(chǎn)品多：有GFP Trap，RFP Trap，GST Trap，Dnmt1-Trap；Mk2-Trap；P53-Trap；Mdm4/ HdmX-Trap NEW!更多Trap 新品，給您提供更多的科研工具！GFP，RFP，GST Trap作為標(biāo)簽蛋白的特異性純化方法，Dnmt1-Trap；Mk2-Trap；P53-Trap；Mdm4/ HdmX-Trap 是用于純化目的蛋白。

優(yōu)點(diǎn)六：樣品類型多：mammalian cells（哺乳細(xì)胞）；tissues/ organisms（組織/器官樣本）；bacteria（細(xì)菌）；yeast （酵母）；plants （植物樣本）

 

僅需六個(gè)步驟，30min 僅需6個(gè)步驟，30min 實(shí)驗(yàn)，Chromotek GFP-Trap?_A的5大實(shí)驗(yàn)應(yīng)用：

 →→ →收集細(xì)胞     細(xì)胞裂解      平衡beads      結(jié)合蛋白 ,加入裂解的細(xì)胞   →    清洗beads   →  洗脫蛋白

 

 

（1）實(shí)驗(yàn)不同，裂解的細(xì)胞不同；pulldown 加入的是GFP融合蛋白和第二標(biāo)簽融合蛋白的裂解物；chip實(shí)驗(yàn)為細(xì)胞固定步驟，染色質(zhì)斷裂步驟；

實(shí)驗(yàn)不同，加入的裂解物不同；chip實(shí)驗(yàn)加入的為斷裂的DNA-蛋白復(fù)合物；

 

（2） GFP-Trap 用于IP 實(shí)驗(yàn)（Immunoprecipitation）（免疫沉淀）和Co-IP 實(shí)驗(yàn)（免疫共沉淀） ：

 

Co-IP 實(shí)驗(yàn)（Co-Immunoprecipitation）（免疫共沉淀）原理圖

 

Nano-Traps主要產(chǎn)品見表：

   

 

 

 

 

Nano-booster是利用Atto公司的優(yōu)質(zhì)熒光素共價(jià)結(jié)合到特異性GFP抗體上；當(dāng)GFP 融合蛋白信號(hào)比較弱的時(shí)候，或者熒光蛋白變性后，具有再激活的作用。

 

 

1.固定樣品中細(xì)胞表達(dá)的熒光融合蛋白信號(hào)強(qiáng)度在生理表達(dá)水平通常很低？

2.熒光蛋白的耐光性和量子效率達(dá)不到超分辨顯微鏡的要求（如：3D-SIM, STED或 STORM/ PALM）？

3.許多細(xì)胞生物學(xué)方法如Hcl處理的BrdU檢測(cè)，EdU-Click-It處理或者熱變性的熒光原位雜交（FISH）會(huì)干擾熒光融合蛋白信號(hào)的檢測(cè)，需要重新激活GFP 信號(hào)？

 

 

優(yōu)點(diǎn)一：抗體好---------Nano-Boostern 采用的抗體是基于alpaca的單域抗體片段（VHHS）；具有分子量�。�15Kda）、極端穩(wěn)定（70℃仍保持穩(wěn)定），高親和力（高特異性性結(jié)合GFP蛋白），無普通抗體輕鏈與重鏈污染等一系列優(yōu)點(diǎn)等優(yōu)點(diǎn)；GFP抗體可以特異性結(jié)合綠色熒光蛋白的衍生物，如eGFP, wtGFP, GFP S65T，TagGFP，不與RFP衍生蛋白結(jié)合。

優(yōu)點(diǎn)二：Atto公司的優(yōu)質(zhì)熒光素，具有增強(qiáng)熒光的作用；

優(yōu)點(diǎn)三：作用效果好：

1、作為熒光增強(qiáng)劑使用；

2、對(duì)變性熒光蛋白具有再激活作用；

3、不僅能夠增強(qiáng)信號(hào)，還能夠增加熒光蛋白熒光穩(wěn)定性。

 

優(yōu)點(diǎn)四：產(chǎn)品多：不僅有GFP booster，還有RFP booster；

 

1、產(chǎn)品實(shí)驗(yàn)方法：免疫熒光（IF）,免疫組化（IHC）；

2、產(chǎn)品使用材料：細(xì)胞系，組織切片；

3、產(chǎn)品應(yīng)用方向：熒光顯微鏡，激光共聚焦顯微鏡，超分辨率顯微鏡（3D-SIM，PALM, STED,STORM）；

 

上圖：比較 HeLa 細(xì)胞系核表達(dá)的GFP-融合蛋白，GFP 信號(hào)增強(qiáng)（G FP-Booster_Atto488使用前和使用后）由用戶確定最適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。

EdU-Click-iT? 處理會(huì)導(dǎo)致GFP 信號(hào)的毀壞。 GFP-Booster標(biāo)記了GFP 融合蛋白，因此有激活和加強(qiáng)熒光信號(hào)的作用(稀釋比例 1/200, 1 h at RT) (GFP-Booster with EdU-Click-iT? protocol)。下圖：GFP-Dnmt1 融合蛋白，三色熒光檢測(cè)，同時(shí)檢測(cè)  紅色：5’ EdU-Click-iT? Alexa Fluor 594信號(hào)；綠色，結(jié)合了GFP Booster 信號(hào)；藍(lán)色，DAPI 信號(hào)（在EdU-Click-iT? 處理后GFP Booster）

 

 

Nano-booster主要產(chǎn)品見下表：

 

備注：Invtrogen新推出的Click-iT? EdU檢測(cè)也是以檢測(cè)新合成DNA中摻入的核苷類似物為基礎(chǔ)，但該方法所采用的核苷類似物是EdU，而且不是通過抗體檢測(cè)，而是基于一個(gè)click反應(yīng) --銅催化的疊氮化物和炔烴之間的共價(jià)反應(yīng)。Click-iT檢測(cè)避免了BrdU檢測(cè)所需的苛刻處理?xiàng)l件，可避免DNA變性，維持樣本的形態(tài)，因而提供了一種更可靠且更簡單的方法進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測(cè)。 

 

DAPI，是一種能夠與DNA強(qiáng)力結(jié)合的熒光染料，常用與熒光顯微鏡觀測(cè)。因?yàn)镈API可以透過完整的細(xì)胞膜，它可以用于活細(xì)胞和固定細(xì)胞的染色。在熒光顯微鏡觀察下，DAPI染劑是利用紫外光波長的光線激發(fā)。當(dāng)DAPI與雙股DNA結(jié)合時(shí)，最大吸收波長為358nm，最大發(fā)射波長為461nm，其發(fā)散光的波長范圍含蓋了藍(lán)色至青綠色。 所以不會(huì)影響綠色熒光蛋白的觀測(cè)。

 

 

ChromoTek公司的Chromobodies^?是一種新的極其微小的細(xì)胞內(nèi)功能抗體。它是基于融合有熒光蛋白(e.g.Tag GFP or Tag RFPfrom Evrogen)的來自羊駱抗體重鏈的抗原結(jié)合域結(jié)構(gòu)(V_HH)。和普通抗體不同的是，這些創(chuàng)新的熒光納米探針可以使活細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和進(jìn)程實(shí)時(shí)分析和可視化。因此，Chromobodies^? 是做研究細(xì)胞內(nèi)研究包含高含量分析（HCA）的一種新的理想試劑。

 

除了穩(wěn)定細(xì)胞株，你也可以得到Chromobody?質(zhì)粒，它允許你創(chuàng)建自己的細(xì)胞系或瞬時(shí)表達(dá)Chromobody?。

 

所有Chromobody?結(jié)合域都是經(jīng)過精心挑選，以不干擾內(nèi)源性蛋白質(zhì)的功能，并提供了獨(dú)特的機(jī)會(huì)來標(biāo)記活細(xì)胞中天然蛋白。

 

產(chǎn)品形式：質(zhì)�；蛘呒�(xì)胞系產(chǎn)品。

 

 

 

 

ChromoTek推出一系列高質(zhì)量常見抗體見下表：