Nature使用Simple Western進(jìn)行兩細(xì)胞胚胎蛋白質(zhì)研究
最新一期Nature發(fā)表了挪威奧斯陸大學(xué)附屬醫(yī)院和美國加州路德維格癌癥研究所科學(xué)家發(fā)表的文章,Broad histone H3K4me3 domains in mouse oocytes modulate maternal-to-zygotic transition,doi:10.1038/nature19360,Nature, Vol 537,548-552.
組蛋白動態(tài)甲基化修飾在母體-合子過渡非常重要,但是在微量細(xì)胞中分析染色體組蛋白甲基化修飾存在技術(shù)瓶頸,本文作者開發(fā)了微量樣品的Chip-sequence技術(shù)進(jìn)行母體-合子過渡過程中組蛋白甲基化。KDM5A and KDM5B是母體-合子過渡必須蛋白,因此基因敲除是研究必須手段。在基因敲除后,需要在蛋白水平確認(rèn)敲除結(jié)果。 因為培養(yǎng)的胚胎珍貴,少量細(xì)胞無法用傳統(tǒng)方法進(jìn)行檢測,Simple Western使用毛細(xì)管進(jìn)行檢測,可以使用微量樣本進(jìn)行檢測,解決了在胚胎研究中微量樣品蛋白質(zhì)檢測問題。
文章中作者使用132個兩細(xì)胞胚胎,進(jìn)行KDM5A,KDM5B基因敲除結(jié)果。