ChromaTrap™ ChIP技術(shù)在多篇發(fā)表論文中獲高度肯定
瀏覽次數(shù):2459 發(fā)布日期:2015-7-10
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Porvair Sciences 報(bào)告指出,研究人員發(fā)表的論文中都一致高度贊揚(yáng)了 ,并引證該項(xiàng)快速、靈敏的技術(shù)對他們的研究帶來了哪些好處。
在C.R Williams et al (Am J Physiol Cell Physiol 303:C213–C223, 2012) 發(fā)表的論文中,Chromatrap 用于評(píng)測人體主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分別經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)濃度和高濃度葡糖糖處理后,NFkB p65 與 Nox4 啟動(dòng)子的結(jié)合情況。采用 Chromatrap pro A 離心柱所獲得的 ChIP 測定數(shù)據(jù)證明,葡萄糖濃度越高,NfkB 與 Nox4 啟動(dòng)子的結(jié)合程度越高,而細(xì)胞內(nèi)的羅格列酮會(huì)衰減 NfkB 與啟動(dòng)子結(jié)合的能力。他們的研究結(jié)果證實(shí)了出現(xiàn)高血糖后,NFkB/p65-Nox4 軸正是血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)羅格列酮的主要目標(biāo)。
在 C.Sullivan et al (PLOS ONE, Dec 2012, 7 (12), pp 7-13) 發(fā)表的論文中,Chromatrap 用于調(diào)查 FOXM1 轉(zhuǎn)錄因子與人體 (U205) 骨肉瘤細(xì)胞株和 CWR22rv 前列腺癌細(xì)胞株中 CDC25A 基因之間的關(guān)聯(lián)。研究人員采用 Chromatrap Pro A 離心柱法評(píng)估 FOXM1 與 CDC25A 基因的結(jié)合情況,結(jié)果顯示兩個(gè)細(xì)胞株中的 CDC25A 基因上富集了大量的 FOXM1,同時(shí)細(xì)胞株中的 IgG 呈現(xiàn)負(fù)值。此項(xiàng)研究很好地佐證了研究人員的假設(shè),同時(shí)也對得出 CDC25A 是 FOXM1 轉(zhuǎn)錄因子的直接目標(biāo)基因的這項(xiàng)新穎測定技術(shù)進(jìn)行了大篇報(bào)道。兩篇論文都充分利用了 Chromatrap ChIP 測定法的種種優(yōu)點(diǎn),如高速協(xié)議(不到 5 小時(shí))、易于使用的固態(tài)檢測試劑、出色不凡的 DNA Pull down 水平、極高的聲噪比,同時(shí)非特異性結(jié)合保持在較低水平。
2012 年全球發(fā)布 - 諸多項(xiàng)目都得出這一點(diǎn):® 固態(tài) ChIP 技術(shù)的效率遠(yuǎn)超傳統(tǒng)基于磁珠的測定法。這是因?yàn)榕c蛋白質(zhì) A 或 G 結(jié)合的固相多孔聚合物的表面積更大,有利于染色質(zhì)抗體結(jié)合,同時(shí)非特異性結(jié)合保持在較低水平。此外,該測定法采用的是離心柱法,其速度、流程和carry-over優(yōu)勢是瓊脂糖凝膠或磁珠遠(yuǎn)不可相比的。Chromatrap® 技術(shù)獲得的 DNA Pull down 水平要比傳統(tǒng)方法高出 25 倍,DNA 富集的聲噪比提高到 2 至 3 倍。即使每一個(gè)免疫沉淀反應(yīng)的樣品小到50ng至3000ng, Chromatrap®的頂尖性能都不容小覷。
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